目的篩選具有提高神經(jīng)內(nèi)肽酶(nep)活性從而降低神經(jīng)細胞β-淀粉樣肽(aβ)水平的藥物,為臨床治療阿爾茨海默癥(ad)提供實驗依據(jù)。方法以脂質(zhì)體lipofectaminetm2000介導(dǎo)瑞典突變型淀粉樣肽前體蛋白(sweapp)表達質(zhì)粒pcdna3.1-sweapp轉(zhuǎn)染神經(jīng)母細胞瘤細胞sk-n-sh,g418篩選獲得穩(wěn)定表達細胞株作為ad模型細胞,采用蛋白印跡技術(shù)檢測sweapp表達情況,酶聯(lián)免疫吸附試驗(elisa)檢測細胞培養(yǎng)基中a4β0和a4β2含量變化,進而以mtt法檢測各天然藥物對sk-n-sh細胞增殖能力的影響,確定藥物的有效濃度及最佳作用時間,以nep肽酶實驗檢測藥物對nep酶活性影響,elisa法檢測藥物對aβ水平的影響。結(jié)果western blot結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染后sk-n-sh細胞高表達sweapp蛋白;elisa結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染后的sk-n-sh細胞分泌a4β0、a4β2明顯升高,分別為轉(zhuǎn)染前的7.26和3.27倍(p<0.05)。nep肽酶實驗檢測結(jié)果顯示,茶多酚、人參皂苷rb1、rg3能夠明顯提高nep酶活性,分別為(117±2.8)%(、131±4.0)%和(121±1.6)%。eli...完成機構(gòu)：山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究所 山東大學(xué)附屬濟南市中心醫(yī)院